免疫组化二抗检测系统主要分为:生物素检测系统和非生物素检测系统。
经典的生物素系统的检测系统是以生物素与卵白素或者生物素与抗生物素蛋白之间高亲和结合的原理为基础的检测方法,如SP、ABC法等,这些都是90年代后期实验研究与临床实验室广泛采用的检测方法。但是,由于内源性亲和素和生物素广泛存在,经典的SP、 ABC等法使用时常导致出现背景着色或假阳性,尤其是内源性生物素丰富的肝、肾组织染色时很难避免。在使用这种检测系统时,为了保证免疫组化结果的准确性,必须先用卵白素对组织的内源性生物素进行饱和封闭,操作步骤较为繁琐,耗时较长。
目前常用的检测系统是非生物素检测系统。早期的非生物素检测系统主要是通过链条式多聚葡聚糖或氨基酸骨架联接的二抗、辣根过氧化物酶多聚物从而对特异信号进行放大的检测系统,如EnVision、PowerVision等。这些检测方法操作程序简便,并避免了内源性生物素的干扰,同时保持了较高的检测灵敏度。
新一代的非生物素检测系统较早期的产品又有了显著的改进(如iVisionTM)。最新的葡萄串式酶的紧凑标记技术,使二抗上可以连接更多的标记酶,同时保持紧凑而稳定的小分子结构(Micro-polymer),因此具有更好的组织渗透能力及更高的检测灵敏度。
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